1、概述
1.1臭氧(03)殺菌消毒作用：
1.1.1臭氧(03)是一種廣譜滅菌劑，具有強烈殺菌消毒作用。
1.1.2在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個氧原子（O），后者具有很強的活性，對細菌有*的氧化作用，臭氧氧化分解了細菌內(nèi)部葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結(jié)合成為氧分子（O2），不存在任何有毒殘留物，為無污染消毒劑。
1.1臭氧(03)發(fā)生器設備技術特點：
現(xiàn)選購水冷式臭氧發(fā)生器一臺，設備技術特點：
1.1.1以空氣作氣源，處理過的潔凈氣源進入臭氧發(fā)生器的放電管，產(chǎn)生高濃度臭氧氣體。
1.1.2臭氧放電室采用外循環(huán)水冷卻系統(tǒng)，保證了臭氧發(fā)生時發(fā)熱能迅速帶走，因而臭氧產(chǎn)量穩(wěn)定，可連續(xù)工作。
1.1.3采用新型高頻大功率開發(fā)電源和逆變電源，使單機臭氧產(chǎn)量利用面板調(diào)節(jié)旋鈕可任意調(diào)節(jié)，可適用一機帶體積不同的多個HVAC系統(tǒng)，保持不同的HVAC系統(tǒng)臭氧濃度穩(wěn)定。
1.1.4選用先進PLC控制及報警系統(tǒng)，對水溫、水流、電流、氣壓，等多種參數(shù)實施在線監(jiān)控、報警和保護，確保設備安全正常運行。
1.1.5先進的微電腦控制系統(tǒng)，可根據(jù)需要自行設定運行時間，操作簡便，實現(xiàn)無人值守。
1.2現(xiàn)采用臭氧發(fā)生器對質(zhì)量控制*/C級、D級潔凈室進行消毒。
2、驗證目的
2.1通過對在一定的時間潔凈室（區(qū)）內(nèi)臭氧濃度的測試，驗證在預定的消毒程序時間內(nèi)潔凈區(qū)各潔凈間臭氧濃度是否達到標準規(guī)定；
2.2通過微生物挑戰(zhàn)性試驗，確定在預定的消毒程序時間內(nèi)臭氧對潔凈室（區(qū)）的消毒效果。
3、驗證范圍
臭氧對質(zhì)量控制*/C級、D級潔凈室（區(qū)）的消毒 。
4、驗證小組成員及責任
4.1生產(chǎn)部
4.2工程部
4.3質(zhì)量部
4.4質(zhì)保部
4.5質(zhì)控部
5、驗證操作內(nèi)容
5.1預確認
5.1.1臭氧發(fā)生器的選擇
5.1.1.1臭氧消毒的濃度（C）：按衛(wèi)生部《消毒技術規(guī)范》1991年標準和臭氧消毒的效率對空氣中浮游菌，臭氧滅菌的濃度為（2～4）×10-6；對物體表面的沉降菌，臭氧滅菌的濃度為（10～15）×10-6。
5.1.1.2臭氧的自然半衰期（S）：參比狀態(tài)下為20min左右；1h衰退率約為62.25%；設計、運用臭氧消毒60min達到相對濃度后，繼續(xù)維持一段時間（1—1.5小時），即可達到機器、設備和建筑物表面沉降菌的殺滅目的。
5.1.1.3消毒空間體積（V）：
（1）以選擇合適的臭氧發(fā)生器為前提，設潔凈區(qū)體積為V1，HVAC系統(tǒng)風管容積為V2，為保持潔凈區(qū)正壓所補充的新風的臭氧消耗量為V3。 V3的確定根據(jù)消毒歸納出較可靠的經(jīng)驗公式：V3=HVAC系統(tǒng)循環(huán)總風量（m3/h）×25%（假定新風補充量為25%）×10%（保持潔凈區(qū)正壓所補充的新風量）×33.75%（計算應用臭氧半衰率的預算值）
即：V3≈循環(huán)系統(tǒng)總風量×0.944%
則消毒空間體積為：V=V1+V2+V3
按上述要求，空氣中的臭氧濃度（C）應達到10×10-6，折算為19.63mg/m3；臭氧發(fā)生器工作1h后，臭氧自然衰退率（S）為62.25%；則選擇臭氧發(fā)生器的臭氧發(fā)生量W（mg/h）：

空調(diào)機組為JK-1，送風量：25000 m3/h，控制凈化面積395.02m2，潔凈要求（*/C級、D級）；外置式臭氧發(fā)生器，用管線連到空調(diào)機箱上，使用時，同時對空調(diào)系統(tǒng)箱和風管及潔凈室的進行消毒。
按潔凈室體積及空調(diào)系統(tǒng)風管體積等計算所需臭氧量：
潔凈室體積為V1；HVAC系統(tǒng)風管體積為V2，V3為保持潔凈室正壓所補充的新風的臭氧量。
消毒空間體積為：V=V1+V2+V3
式中V3=HVAC系統(tǒng)循環(huán)總風量（m3/h）×25%(新風補充量)×10%(保持潔凈區(qū)正壓需補充的新風量)×37.75%(計算應用臭氧半衰期的預算值)≈循環(huán)系統(tǒng)總風量×0.944%。
JK-1：V1=987.55m3；V2=27.5m3；V3=25000×0.944%=236m3；
V=V1+V2+V3=987.55m3+27.5 m3+236m3=1251.05 m3。
消毒空間體積V=1251.05+1225.33=2476.38 m3。
5.1.1.4臭氧濃度（C）計算：空氣中的臭氧濃度（C）應達到10×10-6，折算為19.63mg/m3.臭氧發(fā)生器工作1h后，臭氧自然衰退率（S）為62.25%；則選擇臭氧發(fā)生器的臭氧發(fā)生量W（mg/h）：
5.1.2臭氧發(fā)生器選型：以上計算結(jié)果表明，質(zhì)量控制潔凈室控制的凈化面積所需的臭氧zui大量是130g/h，因此，一臺臭氧發(fā)生量為130g/h的臭氧發(fā)生器，即能滿足要求。
5.2.2臭氧發(fā)生器設備檢測結(jié)果記錄。
5.3安裝確認（IQ）
5.3.1目的：評價臭氧發(fā)生器的安裝是否符合設計規(guī)范及工藝要求。
5.3.2方法：檢查電氣部分、輔助設施配套情況、機器安裝情況、機器安裝區(qū)域等。
5.3.3標準：
a、電氣部分：電源控制系統(tǒng)和臭氧發(fā)生器一體式裝置；電源380V/50HZ，連接方式正確，觸點牢固，有良好接地。
b、輔助設施配套情況：
冷卻水：進口管道4′PVR管，閥門控制進水量；出水管道4′PVR管，直接排出，出口通暢。
壓縮空氣進氣系統(tǒng)包括：捷豹EV51空氣壓縮機、油水過濾裝置、吸附干燥制氧裝置、精密過濾器、減壓裝置等。
空氣壓縮機具有安全可靠的結(jié)構(gòu)設計；運轉(zhuǎn)平穩(wěn)、噪音低；自動壓力開關及自動卸載系統(tǒng)等功能。
排氣量：0.21m3/min（12.6 m3/h）。
c、安裝：
臭氧發(fā)生器安裝位置：臭氧發(fā)生器放在凈化系統(tǒng)送、回風管道的外面，將自凈的臭氧化氣體，通過4′不銹鋼管，直接連接到兩臺空調(diào)機組回風段，充入HVAC系統(tǒng)的中，然后被送到各潔凈室；
臭氧出口管路上不能安裝閥門；臭氧發(fā)生器和主控柜基本水平，柜體高度方向與地面垂直水平，各連接部件應堅固、牢靠；主控柜到臭氧發(fā)生器之間的連接線，應穿PVC阻燃管加以保護，且布線應整齊、美觀。
5.4運行確認（OQ）臭氧濃度測試
5.4.1目的：確認潔凈區(qū)在臭氧發(fā)生器正常消毒時間2小時內(nèi)，臭氧濃度符合設計要求。
5.4.2合格標準
5.4.2.1臭氧發(fā)生器各步程序運行正常，與操作說明書相符；
5.4.2.2臭氧濃度：在臭氧發(fā)生器開啟后40min內(nèi)潔凈室內(nèi)臭氧濃度≥10ppm（19.63mg/m3）；且所有潔凈區(qū)域中臭氧濃度均≥10ppm。
5.4.2.3消毒時間：所有潔凈區(qū)域內(nèi)臭氧濃度達到10ppm時開始計時，直到臭氧發(fā)生器停止工作臭氧濃度降至10ppm時終止，時間應≥60min；
5.4.2.4臭氧滅菌后，臭氧濃度衰減至安全標準0.15ppm所需的時間應≤30min。
5.4.3試驗條件
5.4.3.1環(huán)境條件：環(huán)境溫度16～28℃；相對濕度45～65%；室內(nèi)無外界強氣流，無強烈陽光照射或其他熱輻射。
5.4.3.2消毒時關閉新風口和回風排放閥門，使整個被消毒的潔凈區(qū)空氣通過凈化系統(tǒng)風管形成循環(huán)，臭氧發(fā)生器開始工作。
5.4.3.3臭氧濃度測試儀器：真空式手動采樣器。
5.4.3.4測試原理：檢測管測試采用化學比色原理，直讀分析數(shù)據(jù)。
5.4.3.5臭氧濃度測試方法：割斷檢測管的兩端封口；將檢測管插在采樣器的進氣口上，將采樣器手柄拉至第二檔位，采樣100ml，待檢測管中指示劑變色終止，即可從白色柱所致刻度，讀出臭氧體積濃度(ppm)數(shù)據(jù)。
5.4.3.6臭氧檢測濃度單位mg/m3與ppm的關系及換算公式：質(zhì)量濃度（mg/m3）=臭氧分子量（M）/22.4(標準狀態(tài)下氣體的摩爾體積B)×體積濃度(ppm)×（273/(273+T)）×（Ba/101325）
體積濃度(ppm)=質(zhì)量濃度（mg/m3）/（臭氧分子量（M）/22.4(標準狀態(tài)下氣體的摩爾體積B)）/[（273/(273+T)）×（Ba/101325）]
5.4.4每一測試點應同時測試兩個平行樣。
5.4.5測試時檢測人員應戴防毒口罩，防止臭氧中毒。
5.4.6測試過程
5.4.6.1應將下列工作準備就緒：
（1）設備安裝穩(wěn)固；
（2）電氣連接；
（3）檢查臭氧出口是否通暢；
（4）打開外接冷卻水進水閥門；
（5）在主控柜程控定時器器上設定臭氧發(fā)生器消毒時間為2小時。
5.4.6.2按下啟動按紐，綠色指示燈亮，定時器開始計時，同時臭氧管開始工作，緩慢調(diào)節(jié)濃度旋鈕至正常值區(qū)域。具休操作程序見臭氧發(fā)生器標準操作程序。
5.4.7 臭氧濃度－時間分布測試。
5.4.7.1目的：檢測潔凈區(qū)空氣消毒時，設定臭氧發(fā)生器消毒工作時間2小時內(nèi)，空氣中臭氧分布密度和作用時間：
（1）確定臭氧滅菌所需的濃度10ppm所需的時間：≤40min；
（2）確定所有潔凈區(qū)域內(nèi)臭氧濃度達到10ppm時開始計時，直到臭氧發(fā)生器停止工作臭氧濃度降至10ppm時終止，維持時間應≥60min；
確定臭氧消毒后，臭氧濃度衰減至安全標準（0.15ppm）所需的時間：≤30min。
5.4.7.2測試地點：選取距離空調(diào)箱送風口zui遠且送風口分布zui房間(D101男脫衣洗手間)進行測試。
5.4.7.3測試方案：臭氧發(fā)生器開啟時開始測試，每10分鐘用ZG-1型真空式手動采樣器采樣測試一次；發(fā)生器開啟40min后，此時臭氧濃度呈緩慢上升，近似平臺；連續(xù)監(jiān)測2h；臭氧發(fā)生器關閉，空調(diào)送風時測試一次，10min后測試一次，連續(xù)監(jiān)測1h（監(jiān)測在空調(diào)送新風時臭氧濃度的衰減）。
5.4.8臭氧濃度--空間分布測試。
5.4.8.1目的：檢測在該HVAC系統(tǒng)所控制的潔凈區(qū)域各潔凈室內(nèi)臭氧分布濃度的一致性，確定滅菌過程中，各潔凈室內(nèi)，均能維持必要的濃度。
5.4.8.2測試地點：選取關鍵房間。
5.4.8.3測試方案：從臭氧發(fā)生器開啟40min后，每10分鐘用ZG-1型真空式手動采樣器采樣測試一次。
5.4.8.4測試結(jié)果記錄。
5.5性能確認（微生物挑戰(zhàn)試驗）
5.5.1目的：確認預定的臭氧消毒程序在潔凈區(qū)空間消毒后，微生物殺滅率≥90%。
5.5.2金黃色葡萄球菌挑戰(zhàn)性試驗。
5.5.2.1生物指示劑的制備：取金黃色葡萄球菌制備菌液；培養(yǎng)48小時候，稀釋成1200個/ml。臨用前在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿中加入1ml上述菌液，并使之再培養(yǎng)基表面均勻分布。
5.5.2.2選取關鍵房間，每個房間放置2碟。
5.5.2.3臭氧發(fā)生器開啟的同時打開注有菌液的培養(yǎng)皿上蓋，至臭氧消毒程序結(jié)束。
5.5.2.4把培養(yǎng)皿放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)48 h，進行菌落計算。同時以未經(jīng)臭氧處理的培養(yǎng)皿做空白對照。
5.5.2.5計算殺滅率：
殺滅率（%）=消毒前對照組平均菌落數(shù)-消毒后平均菌落數(shù)
                        ————————————————————x100%
                                     消毒前對照組平均菌落數(shù)

5.5.2.6微生物挑戰(zhàn)試驗和臭氧濃度測試同步進行。
5.5.2.7上述試驗應連續(xù)進行三次，確認滅菌過程的重現(xiàn)性。